Les quatre principales méthodes d'analyse microbienne comprennent la mesure de la croissance, le comptage microbien, l'indice physiologique et la microscopie des frottis.
Mesure de la croissance
Mesure du volume : L'état de croissance des micro-organismes est reflété en mesurant la quantité d'hyphes dans un certain volume de milieu de culture. Cette méthode est simple et rapide, mais l’erreur est importante.
Méthode du poids sec : Le poids sec des micro-organismes est déterminé par centrifugation ou filtration. Cette méthode est plus lourde et est généralement utilisée lorsque le produit microbien est une cellule bactérienne, comme de la levure sèche, des aliments pour animaux, etc.
Turbidimétrie : La valeur d'absorbance à une certaine longueur d'onde est mesurée par un spectrophotomètre ultraviolet pour déterminer l'état de croissance des micro-organismes. Cette méthode est principalement utilisée pour la surveillance de la croissance bactérienne dans l’industrie de la fermentation.
Mesure de la longueur du mycélium : Pour les champignons filamenteux et certains actinomycètes, la longueur de croissance des hyphes sur une certaine période de temps peut être mesurée sur le milieu de culture.
Méthode de comptage microbien
Méthode de l'hémocytomètre : simple, intuitive et rapide, mais adaptée uniquement au comptage des spores produites par des micro-organismes unicellulaires ou des micro-organismes filamenteux, et les résultats incluent les bactéries mortes et vivantes23.
Méthode de comptage par coloration : utilisez des colorants tels que le rouge neutre, le bleu trypan et le bleu de méthyle pour distinguer les cellules mortes des cellules vivantes.
Méthode de dilution liquide : effectuez une dilution en série de dix fois de l'échantillon bactérien inconnu, enregistrez le nombre de tubes à essai avec croissance à chaque dilution après culture, puis calculez le contenu bactérien vivant en fonction du multiple de dilution de l'échantillon. Cette méthode est plus lourde, mais le nombre de bactéries vivantes peut être calculé.
Méthode de comptage des colonies sur plaques : étalez la solution bactérienne diluée sur un milieu de culture solide et calculez le nombre de bactéries dans la solution bactérienne d'origine après culture. Cette méthode permet d’obtenir des informations sur les bactéries vivantes, mais l’opération est lourde et nécessite un certain temps de culture.
Méthode d'indicateur physiologique
Détermination de la teneur en azote : La teneur en azote de la plupart des bactéries est de 12,5 % du poids sec. L’état de croissance des micro-organismes peut être indirectement reflété en mesurant la teneur en azote.
Détermination de la teneur en carbone : utilisez la solution K2Cr2O7 pour mesurer l'absorbance à une longueur d'onde spécifique, tracez une courbe standard pour calculer la quantité de croissance.
Méthode de détermination du sucre réducteur : reflète l'état de croissance des micro-organismes en mesurant la quantité de sucre réducteur, qui est souvent utilisée dans la production de fermentation industrielle à grande échelle.
Détermination d'autres substances physiologiques : y compris l'acide nucléique, l'ATP et d'autres contenus, ainsi que la production d'acide, la production de gaz, la consommation d'oxygène, la production de chaleur et d'autres indicateurs.
Microscopie des frottis
La microscopie des frottis est une méthode d'examen des bactéries, de la cytologie, des bactéries enzymatiques, des microfilaires et des cristaux de cholestérol. En préparant des frottis et en les observant au microscope, la morphologie et la structure des micro-organismes peuvent être comprises intuitivement
